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Technical articles3T3swissSwiss小鼠胚胎成纖維細(xì)胞A549人肺癌細(xì)胞（能產(chǎn)生Keratin）CHOdhfr二氫葉酸缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞CHO-K1中國倉鼠卵巢細(xì)胞Cyc-tAg小鼠T淋巴細(xì)胞瘤（SV40T抗原轉(zhuǎn)染）DU145人前列腺癌細(xì)胞FDC-P1小鼠正常骨髓細(xì)胞GH3大鼠垂體瘤細(xì)胞GT1.1人垂體瘤細(xì)胞（分泌促生長激素分泌激素）HEK-293人胚腎細(xì)胞Hela人宮頸癌細(xì)胞MC3T3-E1小鼠胚胎成骨細(xì)胞MCF7人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-435s...
一、導(dǎo)論質(zhì)粒提取的原理:轉(zhuǎn)自復(fù)旦大學(xué)一位老師的帖子，后面是方法介紹堿裂解法從大腸桿菌制備質(zhì)粒，是從事分子生物學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)室每天都要用的常規(guī)技術(shù)?？墒俏沂昭芯可畮啄炅?，幾乎毫無例外的是我那些給人感覺什么都知道的學(xué)生卻對(duì)堿法質(zhì)粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因?yàn)椤斗肿涌寺 防锩嬷恢v實(shí)驗(yàn)操作步驟，而沒有對(duì)原理進(jìn)行詳細(xì)的論述。這是導(dǎo)致我的學(xué)生誤入歧途的主要原因。后來我發(fā)現(xiàn)其實(shí)是整個(gè)中國的相關(guān)領(lǐng)域的研究生水平都差不多，甚至有很多“老師”也是這個(gè)狀態(tài)。這就不得不讓人感到悲哀了...
FluorescentDye（熒光染料）Excitation（激發(fā)波長，nm）Emission（發(fā)射波長，nm）Cy2489506GFP（RedShifted）488507YO-PRO-1491509YOYO-1491509Calcein494517FITC494518FluorX494519Alexa488490520Rhodamine110496520ABI,5-FAM494522OregonGreen?500503522OregonGreen?488496524Rlbo...
（一）原理DEAE-SephadexA-50（二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50）為弱堿性陰離子交換劑。用NaOH將CL-型轉(zhuǎn)變?yōu)镺H-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白屬于中性蛋白（等電點(diǎn)為PH6.85～7.5），其余均屬酸性蛋白。在PH7.2～7.4的環(huán)境中，酸性蛋白均被DEAE-SephadexA-50吸附，只有γ球蛋白不被吸附。因此，通過柱層析γ球蛋白便可在洗脫中先流出,而其他蛋白則被吸附在柱上,從而便可分離獲得純化的IgG。DEAE-sephadexA-50柱層析是...
1975年，Kohler和Milstein發(fā)現(xiàn)將小鼠骨髓瘤細(xì)胞和綿羊紅細(xì)胞免疫的小鼠脾細(xì)胞進(jìn)行融合，形成的雜交細(xì)胞既可產(chǎn)生抗體，又可無限增殖，從而創(chuàng)立了單克隆抗體雜交瘤技術(shù)。這一技術(shù)上的突破不僅為醫(yī)學(xué)與生物學(xué)基礎(chǔ)研究開創(chuàng)了新紀(jì)元，也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。制備單克隆抗體包括動(dòng)物免疫、細(xì)胞融合、選擇雜交瘤、檢測(cè)抗體、雜交瘤細(xì)胞的克隆化、凍存以及單克隆抗體的大量生產(chǎn)，要經(jīng)過幾個(gè)月的一系列實(shí)驗(yàn)步驟，下面按照制備單克隆抗體的流程順序，逐一介紹其實(shí)驗(yàn)方法。細(xì)胞融合前準(zhǔn)備細(xì)...
撰稿李恩善免疫血清的制備是一項(xiàng)常用的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。價(jià)、高特異性的免疫血清可作為免疫學(xué)診斷的試劑（如用于制備免疫標(biāo)記抗體等），也可供特異性免疫治療用。免疫血清的效價(jià)高低取決于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫反應(yīng)性及抗原的免疫原性。如以免疫原性強(qiáng)的抗原刺激高應(yīng)答性的機(jī)體，?？色@得價(jià)的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫時(shí)，則需同時(shí)加用佐劑以增強(qiáng)抗原的免疫原性。免疫血清的特異性主要取決于免疫用抗原的純度。因此，如欲獲得高特異性的免疫血清，必須予先純化抗原。此外，抗原的劑量、免疫途徑及注射抗原的時(shí)間...
薄基底膜腎?、粜湍z原α鏈分布的免疫組化研究張承英朱世樂章友康鄭欣鄂潔侯平薄基底膜腎?。═BMN）是以持續(xù)性鏡下血尿?yàn)橹饕憩F(xiàn)的一種遺傳性腎病，腎小球基底膜（GBM）彌漫性變薄為該病惟一重要的病理學(xué)特征。既往關(guān)于Alport綜合征（Alportsyndrome,AS），另外一種以持續(xù)性鏡下血尿,GBM變薄增厚、撕裂、分層為特征的遺傳性腎病，Ⅳ型膠原α鏈分布的免疫組化研究較多，眾多研究表明,AS患者腎小球基底膜Ⅳ型膠原α3、α4、α5鏈表達(dá)缺陷［1］,而關(guān)于薄基底膜腎?、粜湍z原α...
趙彩彥劉金星王淑琴甄真周俊英采用ABS-ELISA法（藥盒由比利時(shí)Innogentics公司提供）和雙抗體夾心ELISA法（藥盒由法國Immunotech公司或軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院提供）對(duì)46例肝炎肝硬化進(jìn)行了血清和腹水中IL-6、IL-2、TNF-α的測(cè)定。與正常對(duì)照組比較，肝炎肝硬化患者血清和腹水IL-6、TNF-α水平明顯升高，IL-2水平明顯降低。合并自發(fā)性腹膜炎（SBP）患者血清IL-6、TNF-α水平為（33.19±12.31）ng/L,（11.73&pl...
當(dāng)前位置：
